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细胞间生物安全管理规程
来源:庞代文课题组 时间:2020年06月

生物安全,即避免危险生物因子造成实验室人员暴露、向实验室外扩散并导致危害的综合措施。为了实验室各位老师同学的人身安全和大家能顺利安全的开展实验,特制定细胞间生物安全管理规程如下:

一、  细胞间通用生物安全管理规程

1. 需要在细胞间做实验的同学必须经过生物安全培训。

2. 进入细胞间,所有实验操作必须带手套;摘除手套后应例行洗手。用完手套要及时清理。

3. 请进出细胞间的同学随手关门,包括缓冲间与操作间之间的门,严禁同时打开外门和内门。

4. 实验废弃物处理:普通垃圾如酒精棉,注射器的塑料包装,细胞培养皿的包装等可直接丢入垃圾桶中;生物危害垃圾须收集并丢入缓冲区域的医疗废物桶中;针头或碎玻璃须丢入利器盒;液体废物可用废液泵收集并泡84后倒入水池。医疗废物垃圾桶内禁止倒入液体。

5. 请各位同学实验以后自觉清理自己的实验废物,还原所用的公用器具,整理公用试验台面,不要给接下来实验的同学带来麻烦,也不要给值日生增添负担。

6. 移液枪使用后务必还原,调回最大取液量。

7. 胰酶请各位同学取一支后各自保存使用;血清由于价格较高,请同学们统一用一支,每天最后一位同学用完后请放入-80度冰箱中。

8. 细胞间冰箱内实验用品没三个月清理一次。

9. 冻存的细胞储存于细胞间的液氮罐内,严禁反复长时间打开液氮罐,以免液氮挥发太快

10.   冻存细胞用专用的DMSO,分装为1mL/管,如有冻存细胞操作需要向管理员领取。

11.   细胞间内枪头盒,离心管,滤膜等由管理员统一准备,请大家节约使用。快用完的时候请拿一盒新的放进安全柜内;使用完的枪头盒,离心管的烧杯等请放到细胞间的公共区域,并提醒管理人员及时补充。

二、  生物安全柜的操作规程

1. 需要使用生物安全柜的同学请先预约,预约时间最多只能提前48h

2. 生物安全柜内必备物品:

Eppendof移液枪 1000ul, 200ul, 10ul,相应枪头,1.5ml EP管,滤膜,助吸器,酒精棉,酒精喷壶,镊子,记号笔,4000转定速离心机,废液泵。

3. 使用生物安全柜之前请检查:

生物安全柜里是否有废弃物盒,如果没有须拿一个放入生物安全柜中;

所有进入生物安全柜中的物品都要喷酒精进行消毒;

助吸器是否有电,若助吸器吸液速度变慢了请及时充电;

擦台面的棉球和酒精是否还有,若没有了请及时添加棉球和酒精。

4. 生物安全柜内所有操作须丁腈或乳胶手套进行。

5. 实验完毕后,包装材料如塑料袋,封口膜等可直接丢入生物安全柜下面的垃圾桶,其他如枪头,培养皿等生物危害的垃圾须丢入缓冲区的医疗废物垃圾桶。两类垃圾严禁混丢。废液须吸入废液泵中,严禁丢入医疗垃圾桶。

6. 废弃物盒清空后,须用清水和酒精进行清洗,必要时(比如进行了病毒实验)可泡84消毒,或直接丢弃。在开紫外消毒前,须用酒精棉清理台面,并在里面放入一个清洗后的废弃物盒以便下一位同学使用。紫外灯灭菌30min即可。

7. 开始使用生物安全柜时,可先将挡板升高,抽气2min以便排空臭氧。安全柜使用完毕后,一定确保挡板关严,并且风机停止工作。

三、  细胞培养箱操作规程

1. 培养箱每周换一次超纯水,每月清洁一次

2. 取放细胞的过程中严禁对着培养箱内说话,避免引入细菌;取放细胞手套要喷过酒精。

3. 调节CO2钢瓶的压力为0.06-0.08MPa,调节压力的时候应关闭培养箱,除仪器负责人不应随便调节CO2压力和仪器参数。                    

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